小鼠单核巨噬细胞白血病细RAW264.7

小鼠单核巨噬细胞白血病细RAW264.7
细胞背景
此细胞株源自Abelson鼠科白血病病毒诱导的肿瘤。此细胞株不分泌可检测到的病毒颗粒，XC斑点形成试验阴性。可以胞饮中性红并吞噬乳胶颗粒与酵母聚糖。可以抗体依赖性地分解绵羊红血球与肿瘤靶细胞。LPS或PPD处理2天可诱导分解红血球但对肿瘤靶细胞无作用。
l细胞特性
1）来源：鼠科白血病病毒诱导的肿瘤；单核细胞；巨噬细胞。
2）形态：不规则圆形，纺锤状，贴壁细胞，少量悬浮。
3）含量：>1x106细胞数。
4）规格：T25瓶或者1mL冻存管包装。
5）用途：仅供科研使用。
l培养条件
1）准备DMEM(包含2mM L-谷氨酰胺，0.11g/L丙酮酸钠)(推荐awcell-0001)培养基；优质胎牛血清10%；P/S青霉素-链霉素1%。
2）培养条件：气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
l注意事项
注意事项：
（a）在细胞生长的初始阶段，细胞以贴壁的形式生长并呈现出长方体的形态和有“伪足”延伸。随着培养时间的增加，细胞呈现圆形并以叠加的形式生长。细胞密度达到一定的程度，会有细胞以悬浮的方式散落到到培养基中，镜下观察会发现悬浮和贴壁的细胞会同时出现。
（b）该细胞传代时不需要用胰酶消化。传代时，用无菌细胞刮刮拭培养表面将细胞刮落，收集离心后重悬接种到新的培养瓶中。
（c）该细胞形态上包含松散贴壁的纺锤形和圆形或者立方形。当细胞密度较大时，细胞会轻微脱落变圆或者许多细胞堆积在一起，有些细胞甚至脱落漂浮。这些漂浮的细胞是存活的，在传代时应收集起来，离心后细胞沉淀可以继续培养。
（d）血清质量差异可能引起细胞贴壁能力变化，应选用高质量的胎牛血清。
该细胞为悬浮和轻微的贴壁细胞，传代可以参考以下方法：
该细胞用细胞刮铲替代胰酶来对细胞进行处理。用无菌细胞刮铲刮拭细胞附着培养表面将细胞刮落，收集细胞后离心去上清，重悬后接种到新的装有新鲜培养液的培养瓶内。收货后第一次传代1:2进行，后续可以根据实际的情况以1:2~1:4的比例进行传代。
3）细胞冻存:收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。
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