金克隆增强型ECL超敏发光液
增强型ECL超敏发光液产品介绍:
ECL化学发光试剂盒能够被辣根过氧化物酶(HRP)催化发光。本试剂盒优化了底物组成,使用了新型高效增强剂,发光强度比传统ECL显色液提高了30-100倍,并有效地降低了背景。试剂盒使用新的氧化剂代替不稳定的双氧水,提高了试剂盒的稳定性,室温可稳定放置1年。工作液被HRP催化后,发出特定波长荧光(400-450 nm),可对X光胶片曝光,也可直接使用荧光CCD扫描,主要应用于Western检测以及化学发光免疫检测系统。
使用说明:
一、缓冲液的配置:
1、一抗工作浓度:0.2-1.0µg/mL。
2、HRP标记二抗工作浓度:10-500 ng/mL,根据二抗效价调整。
3、显色液的使用比例:A液:B液=1:1(现用现配);10 cm2转印膜使用1-2 mL工作液。
二、增强型ECL超敏发光液操作步骤:
1、根据常规操作转印结束后,进行封闭、一抗孵育、二抗孵育以及必要的洗膜步骤,根据膜的大小,按每250px2膜使用1-2mL工作液,按比例吸取等体积溶液A和溶液B混匀,配制成发光检测工作液。
2、用平头镊子将膜取出,膜的下缘轻轻接触吸水纸,去除膜上多余的液体。用移液器将工作液加到转印膜上,使其均匀覆盖,室温孵育1-2分钟,此步骤可在洁净保鲜膜上或塑料盒中完成。
3、X光胶片法
a)用平头镊子夹起转印膜,膜的下缘轻轻接触吸水纸,去除膜上多余的液体,留下少量工作液,不要让膜全干燥。膜的蛋白面朝上,包裹于洁净保鲜膜内。轻轻赶出其间的气泡用小块透明胶带粘住四角,固定在X光片暗盒内。
b)在暗室中取一张X光胶片置于包裹的膜上,合上暗盒,曝光30秒至1分钟。立即显影、定影,根据曝光强度,调整下一张X光胶片的曝光时间。如果背景过高,可以使用两张X光胶片同时压片。
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