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dna损伤检测试剂盒

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最后更新: 2023-06-29 16:49
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公司基本资料信息
详细说明
DNA片断化检测:
细胞凋亡时主要的生化特征是其染色质发生浓缩, 染色质DNA在核小体单位之间的连接处断裂, 形成50~300kbp长的DNA大片段, 或180~200bp整数倍的寡核苷酸片段, 在凝胶电泳上表现为梯形电泳图谱(DNA ladder)。细胞经处理后,采用常规方法分离提纯DNA,进行琼脂糖凝胶和溴化乙啶染色,在凋亡细胞群中可观察到典型的DNA ladder。如果细胞量很少,还可在分离提纯DNA后,用32P-ATP和脱氧核糖核苷酸末端转移酶(TdT)使DNA标记,然后进行电泳和放射自显影,观察凋亡细胞中DNA ladder的形成。
一、重要的洗涤:
不充分的洗涤会导致差异和高背景,从而带来不理想的实验结果。如果未结合的材料残留在微孔板中,那么它会增加背景噪音。有必要的话,可增加洗涤液中的盐浓度,这会阻止非特异结合反应。如果背景过高,怀疑洗涤不够时,可以尝试增加洗涤次数。
第二、关键的封闭:
封闭液的作用是让不相关的蛋白占据微孔板中潜在的结合位点。这就降低了可产生信号的抗体非特异结合的机会。如果背景过高,怀疑封闭不充分,那么可以尝试使用更高浓度的封闭液,或适当延长封闭时间。
目前主要有两种类型的封闭液:蛋白和非离子型去污剂。使用的类型须取决于多个因素,包括微孔板的表面试剂、吸附的抗原、抗体和检测试剂。好的封闭液应降低非特异性结合,但它不应当与抗原、抗体或检测试剂发生相互作用。
第三、抗体浓度须优化:
如果试剂稍有不同,则可能需要优化抗体的量。非特异的抗体结合会增加背景。为了防止这一点,切勿使用过多的一抗或二抗。
第四、检测试剂要适量:
切勿使用过多的检测试剂。如果浓度过高,或者未正确稀释,则会导致高背景。也不要显色过度,如有必要,优化一下何时应加入终止液。
dna损伤检测试剂盒
http://www.nbsbioscience.cn/
https://www.chem17.com/st321657/
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